故事發(fā)生在抗日戰(zhàn)爭(zhēng)時(shí)期。因軍統(tǒng)諜網(wǎng)連遭日特破壞，戴笠（王崗 飾）從集中營(yíng)選出因故做牢的陳一鳴（庹宗華 飾）少校，令他組建“眼鏡蛇”特工小組，暗殺日特駐華頭子中村一郎（于震 飾），領(lǐng)命后陳一鳴即刻招募各路高人進(jìn)行培訓(xùn)。這時(shí)，美軍上校梅樂(lè)斯找到戴笠，要他設(shè)法營(yíng)救被中村逮捕的美特工史密斯夫婦。中共高級(jí)特工黃天明（侯勇 飾）得到南京黃云睛（吳曉敏 飾）送來(lái)的情報(bào)，他奉上級(jí)指示，將史密斯夫婦所在位置故意泄露給軍統(tǒng)南京站高站長(zhǎng)，陳一鳴帶著特工小組出發(fā)了。他們化裝混入醫(yī)院，先救出了史密斯夫婦，然后執(zhí)行此次來(lái)的首要任務(wù)：刺殺中村一郎，他們能順利完成任務(wù)嗎……